0518-81263339
蔗糖磷酸合成酶（Sucrose phosphate synthase，SPS）试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
蔗糖不仅是重要的光合产物，也是植物体内运输的主要物质，还是碳水化合物的贮存形式之一。SPS（EC 2.4.1.14）以果糖-6-磷酸为受体，形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。
测定原理：
蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖磷酸与间苯二酚反应可呈现颜色变化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比。
组成：
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产品名称 |
SC008-100T/48S |
Storage |
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提取液：液体 |
100ml |
4℃ |
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试剂一：液体 |
2.5ml |
-20℃ |
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试剂二：1000μg/ml蔗糖溶液 |
10ml |
4℃ |
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试剂三：液体 |
2ml |
4℃ |
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试剂四：液体 |
25ml |
4℃ |
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试剂五：液体 |
6ml |
4℃避光 |
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说明书 |
一份 |
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自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰
样品测定的准备：
按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。
2、样本测定，（在EP管中依次加入下列试剂）：
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试剂名称（μl） |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
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样本 |
10 |
10 |
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蒸馏水 |
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45 |
45 |
55 |
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试剂二 |
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10 |
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试剂一 |
45 |
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混匀，25℃准确水浴10min
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试剂三 |
15 |
15 |
15 |
15 |
沸水浴中煮沸10min左右（盖紧，以防止水分散失），冷却
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试剂四 |
210 |
210 |
210 |
210 |
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试剂五 |
60 |
60 |
60 |
60 |
混匀，沸水浴30min，冷却后，取200μl 至微量石英比色皿或96孔板中，480nm下测定各管吸光值。标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。
SPS活力单位的计算
1、按照蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS活性(μg /min/mg prot)= C标准管×V1×（A测定管-A对照管)÷（A标准管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×（A测定管-A对照管)÷（A标准管-A空白管)÷Cpr
2、按照样本鲜重计算
单位定义：每g组织每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS活性(μg /min/g鲜重) = C标准管×V1×（A测定管-A对照管)÷（A标准管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×（A测定管-A对照管)÷（A标准管-A空白管)÷W
C标准管：标准管浓度，1000μg/ml；V1：加入反应体系中样本体积，0.01ml； V2：加入提取液体积，1ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g；T ：反应时间：10min。
| 象形图 | |
|---|---|
| 警示语 | |
| Class | |
| 警告声明 | |
| UNub | |
| 危险声明 | |
| Packing Group |
| SC008 蔗糖磷酸合成酶（SPS）检测试剂盒（微量法100T48S）.pdf | 下载 |
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